接受全子宫切除术和双侧输卵管切除术妇女的

研究背景及目的

微生物群的特征可用于更好地了解正常菌群对各种疾病状态的影响，高通量测序的发展使得我们能够对存在于身体各部位的微生物群进行前所未有的分析。然而女性上生殖道（包括子宫，输卵管和卵巢）的微生物群尚未彻底研究过。研究显示宫颈和阴道的微生物群落随时间发生变化。此外，在IVF-ET和自然妊娠期间，阴道微生物群已被证明是在发生动态变化的。因此我们推测，女性上生殖道的微生物群落可能发生着类似的波动。

上生殖道的微生物群的特征有助于了解是否存在可能与各种上生殖道疾病有关的因素。临床实践的改变，例如作为降低卵巢癌发生手段的机会性输卵管切除术，可能最终与存在于输卵管内的微生物有关，这可能引起上皮细胞的变化。同样，了解这些微生物群落的结构可能对输卵管积水找到治疗的靶点，从而替代输卵管切除术，亦对提高IVF妊娠率有所帮助。卵巢中微生物的存在也可能在卵泡发育、多囊卵巢综合征、女性更年期变化及卵巢早衰等方面起着作用。对这些上生殖道部位的探索性研究可能是许多妇产科疾病的关键。

为了调查整个女性生殖道中可能存在的细菌，并且对这些身体部位之间和/或不同患者之间的微生物群落的组成差异性进行初步评估，我们进行了一项试点研究来检测个体本身及个体之间的整个阴道、子宫颈、子宫、输卵管和卵巢的微生物群落的组成。

研究的设计方法、研究人群

这是针对于年9月至11月在瓦尔特里德国国家军事医疗中心（WRNMMC）进行全子宫切除术和双侧输卵管切除术妇女的一项前瞻性试点研究。共有10名妇女从我院妇产科和妇科肿瘤科招募，并参加了研究。

参与者排除标准

年龄＜18岁，艾滋病毒感染状态或其他免疫抑制状态，妊娠状态，有活动性机会性感染的证据或免疫缺陷导致活动性机会性感染，近6个月内盆腔炎史，近30天内抗生素治疗史，并在近6个月诊断出性传播感染包括已知的衣原体治疗史。

标本获取及实验方法

所有患者在切皮前30分钟内预防性使用头孢唑啉抗感染，青霉素过敏者使用左氧氟沙星和甲硝唑（4号患者）。从切皮到标本离体的平均时间为分钟（范围为88-分钟）。抗生素应用之后从每个患者的阴道、子宫颈、子宫内膜、输卵管、子宫肌层和卵巢中取样。额外的样本从大体标本中收集（即积水的输卵管、肌瘤、囊肿、子宫内膜植入物和可疑的恶性肿瘤）。阴道微生物样本在手术室术前消毒前留取。

从患者组织中分离出基因组DNA，并扩增细菌16S核糖体RNAV1-V3基因组DNA区域，然后使用标准操作程序（测序技术）进行测序。

主要指标来自不同患者以及身体不同部位的样本中微生物的组成

结果

在95％的样本中检测出细菌，剩余的5％的样本中没有检测到细菌16SrRNA的存在。在不同的解剖部位，微生物的丰度不同。子宫肌层、子宫内膜和输卵管与阴道的微生物群之间存在显著差异（P＜.,P=.,P=.,respectively）。

存在于每个解剖位置的微生物群落与样本和患者密切相关。在大多数样本中厚壁菌门的含量是最为丰富的，特别是乳杆菌属。

图三：PcoA展示了使用Jaccard多样性计算器分析后的微生物群的差异性

（A）样本按人群分类（B）样本按身体部位分类

尽管身体不同部位之间的微生物群存在差异，但是Jacob距离矩阵的PCoA分析显示大多数样本的微生物组成是密切相关的，也就是说，大多数OTU在各个身体部位之间是共享的，也导致了大部分样本的聚类之间紧密相关。

注：Operationaltaxonomicunits(OTUs)：扩增后的序列经过核糖体数据库筛选后，所有剩余的序列被分组成操作分类单位（OTU）。每个OTU内的序列至少具有97％相似度。本研究内发现每个身体部位的OTU的数量与该部位细菌的载量是成正比的。本研究发现阴道内的细菌载量和OTU均高于其他部位。

结论这项研究是对整个女性生殖道细菌分布的第一次总体评估，通过16S测序对包括输卵管和卵巢等多个解剖部位的细菌进行检测。无论样本来源于哪个身体部位或来源于哪个患者，它们的微生物概况均密切相关。这项试验的结果将作为未来研究女性生殖道细菌定植与妇科及产科疾病相关性的基础。

关键词：生殖道微生物群；上生殖道定植；卵巢微生物群；输卵管炎；输卵管微生物群

文献引自：MilesSM,HardyBL,MerrellDS.Investigationofthemicrobiotaofthereproductivetractinwomenundergoingatotalhysterectomyandbilateralsalpingo-oopherectomy.FertilSteril.;(3):-e1.

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